bioenno 復(fù)染套件

復(fù)染試劑盒專門設(shè)計用于對已完成酶組織化學(xué)、免疫組織化學(xué)、原位雜交或高爾基體染色的腦切片進行復(fù)染。它還適用于常規(guī)組織學(xué)切片，包括冷凍和石蠟包埋的組織切片以及培養(yǎng)細(xì)胞。該套件提供 3 種復(fù)染溶液（紅色、綠色和紫藍(lán)色），可直接從滴管瓶中使用。這些染料溶液的配方使研究人員能夠以較低的背景對細(xì)胞元素進行可靠、最特異的染色。

(A) 用甲酚紫溶液復(fù)染切片。免疫反應(yīng)產(chǎn)物（棕色）首先使用 Bioenno DAB 試劑盒開發(fā)。 (B) DAB-Co 試劑盒用于培養(yǎng)免疫反應(yīng)性神經(jīng)元（藍(lán)黑色），然后進行中性紅復(fù)染。 (C) 甲基綠復(fù)染。棕色浦肯野細(xì)胞使用 DAB 試劑盒進行培養(yǎng)。 (D) DAB 和 BDHC 試劑盒均用于呈現(xiàn)雙標(biāo)記（分別為棕色和藍(lán)色），然后進行甲酚紫復(fù)染。 (E,F) Bioenno superGolgi 試劑盒用于對樹突棘進行染色（切片厚度為 150 µm），然后進行甲酚紫 (E) 和中性紅 (F) 復(fù)染。所有圖像均取自成年小鼠的大腦。

試劑盒提供的試劑：

• 甲酚紫：30 毫升溶液裝在滴管瓶中。該溶液配制用于對神經(jīng)元細(xì)胞質(zhì)中的尼氏體進行染色。尼氏物質(zhì)（粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)）將被染成紫藍(lán)色。

• 甲基綠：30 ml 溶液裝在滴管瓶中。甲基綠是一種核復(fù)染劑，可將細(xì)胞核染成淺綠色。該溶液已用氯仿純化。

• 中性紅：30 毫升溶液裝在滴管瓶中。該溶液可用作各種組織學(xué)程序中的紅色核復(fù)染劑。

• 醋酸乙醇：30 ml 分化溶液裝在滴管瓶中。大多數(shù)情況下不需要區(qū)分染色。然而，在此溶液中孵育切片可能有助于消除非特異性背景染色。該溶液含有70%乙醇和0.02%乙酸。

使用說明：

(A) 完成免疫組織化學(xué) (IHC/ICC)、 原位 雜交 (ISH) 或高爾基體染色的切片：

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1. 完成 IHC/ICC、ISH 或高爾基體染色，并將組織切片安裝在粘性顯微鏡載玻片上。在室溫（RT，18-25°C）下風(fēng)干載玻片。

2. 在 0.01 M PBS-T 中清洗干燥載玻片 1-5 分鐘，然后在 dH2O 中沖洗 1-3 秒。

3. 將載玻片放在水平表面上，然后將一種復(fù)染溶液涂抹到切片上。確保這些部分全被溶液覆蓋。根據(jù)所需的強度和組織類型，在 RT 下孵育切片 1-5 分鐘。孵育后，用 dH2O 洗掉多余的復(fù)染溶液。

• 在顯微鏡下檢查染色切片以獲得優(yōu)良結(jié)果。

• 優(yōu)良時間應(yīng)由研究者確定。某些特定組織可能需要更長的孵育時間。

4. 如果需要，區(qū)分試劑盒中提供酸性乙醇或 70% 乙醇幾秒到幾分鐘的切片，并在顯微鏡下檢查以獲得優(yōu)良結(jié)果。用 dH2O 洗掉乙醇。

• 細(xì)胞成分和背景的染色強度在酸性乙醇或70%乙醇中快速降低。

• 如果染色較淺，只需重新涂抹復(fù)染溶液并再次孵育切片即可。

5. 將載玻片風(fēng)干，然后直接在 100% 乙醇中脫水切片 1-2 次，每次 3-5 分鐘。在二甲苯或二甲苯替代品中透明，更換2-3次，每次3-5分鐘。使用 Permount® 封固劑蓋玻片。

• 對于較厚的高爾基體染色切片，可能需要更長的脫水和透明時間。

(B) 常規(guī)組織學(xué)切片：

1. 切片應(yīng)安裝在明膠包被的或帶正電的載玻片上。石蠟包埋切片在染色前應(yīng)脫蠟。

2. 風(fēng)干切片/載玻片。在 0.01 M PBS-T 中清洗載玻片 1-5 分鐘，然后在 dH 2 O 中沖洗 1-3 秒。

3. 如上所述，在一種復(fù)染溶液中染色 1-5 分鐘。

4. 如果需要，可在酸性乙醇或 70% 乙醇中分化幾秒至幾分鐘，并在顯微鏡下檢查以獲得優(yōu)良結(jié)果。

5. 在 100% 乙醇中脫水，在二甲苯或二甲苯替代品中澄清，并用如上所述的非水封固劑蓋玻片。

儲存、安全和操作注意事項：

• 將套件存放在 2-25°C 下，并避免強直射光。

• 該試劑盒僅供體外研究使用，不適用于藥物、診斷或其他用途。

• 該試劑盒含有與皮膚接觸、吸入或攝入可能有害的試劑。請勿用嘴移液。使用普通預(yù)防措施避免吸入以及接觸皮膚和眼睛。如果接觸，請立即用大量水清洗并就醫(yī)。如果吞咽，請用水漱口并立即就醫(yī)。

• 在化學(xué)罩下進行實驗。處理試劑盒試劑時，請穿戴合適的防護服、手套和眼睛/面部防護裝置。進行實驗后洗手。

• 可根據(jù)要求提供材料安全數(shù)據(jù)表 (MSDS)。

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